Flowcytometri er en diagnostisk og forskningsteknik, der er kendt i mange år og meget udbredt i onkologi. Flowcytometri tillader, at celler, der udgør suspension i en laminær eller stratificeret, flydende strøm, undersøges med en enhed kaldet et flowcytometer. Hvad er indikationerne for flowcytometri, og hvordan gøres det?
Flowcytometri bruges til diagnosticering af hæmatologiske neoplasmer, fordi de er flydende tumorer, men det er kun en hjælpemetode. Det er dog værd at huske, at der er en kræft, der kun kan diagnosticeres med denne metode. Dette er kronisk lymfocytisk leukæmi.
For andre neoplastiske sygdomme anvendes flowcytometri som et diagnostisk hjælpemiddel, da det viser meget vigtige træk ved neoplastiske celler. Denne metode bruges også til at vurdere effektiviteten af den anvendte behandling.
Flowcytometri - hvad viser det?
Væskestrømmen, der indeholder testpartiklerne, ledes med en konstant hastighed (100-2000 partikler pr. Sekund) gennem måleområdet for cytometeret. Her analyserer optiske metoder former, dimensioner, cellernes indre struktur og deres indhold, f.eks. DNA. Alle celler er mærket optisk.
Målingerne er baseret på spredningsegenskaber af laserlys af individuelle celler eller deres komponenter (kerner, kromosomer, mitokondrier) eller fluorescens induceret af dem.
Optiske signaler konverteres til elektriske signaler, som efter analyse præsenteres grafisk som mono- eller biparametriske distributioner.
Cytometeret muliggør også partikelsegregering efter udgang fra målezonen. Det kan siges, at apparatet arrangerer (adskiller) celler med de samme bestanddele (præparativ sortering) eller isolerer visse typer celler (analytisk sortering).
Flowcytometri muliggør undersøgelse af cellernes populationskarakteristika, analyse af cellulære komponenter (især såsom nukleinsyrer, proteiner, overflade- og celleantigener), enzymatisk aktivitet, membranpotentiale, mitokondrie-aktivitet, intracellulær pH, iontransport og membranfluiditet.
Flowcytometri - anvendelse
Den flowcytometri, der anvendes i diagnostik, gør det muligt at bestemme fænotypen af neoplastiske celler og ekspressionen af individuelle proteiner. For at opnå dette anvendes mærkede fluorescerende antistoffer, som på en karakteristisk måde binder til antigener på overfladen af cellemembranen. Takket være dette er det muligt at bestemme graden af deres differentiering, oprindelse, prognostiske og terapeutiske markører, hvilket letter beslutningen om yderligere diagnostiske og terapeutiske procedurer.
En anden anvendelse til flowcytometri er at overvåge effektiviteten af den behandling, der anvendes, ved at vurdere den såkaldte "restsygdom", som er procentdelen af celler med tumorlignende fænotyper, der er tilbage efter behandling.
Flowcytometri letter også forskning i kræft. Takket være denne metode er det muligt at søge efter f.eks. Receptorer, der er placeret på overfladen af neoplastiske celler og kan blive behandlingsmål.
Metoden gør det muligt at evaluere aktiviteten af proteiner inde i cellen. Det er også muligt at evaluere cellecyklussen, fx ved at bestemme mængden af DNA i cellen.
I proliferationsprocessen passerer en celle gennem cellecyklussen gennem faser, hvor den fordobler mængden af DNA. Ved at vurdere denne mængde er det muligt at indikere, hvilken fase cellerne er i, om de formerer sig eller ej, eller om de går i apoptose. Med andre ord kan du ved hjælp af flowcytometri finde ud af, om cellerne forbereder sig på apoptose, den programmerede dødsproces.
Flowcytometri - fremtiden
Flowcytometri har været kendt og brugt i medicin i flere årtier. Det forbedres dog konstant og skaber nye diagnostiske og forskningsmuligheder. I den første periode med anvendelse af denne metode var det kun muligt at bestemme størrelsen og graden af granularitet af celler.
Brug af laserlys i flowcytometriindretninger giver dig mulighed for at begejstre visse fluorescerende markører og derefter evaluere deres emission. Moderne cytometre tillader en signifikant stigning i antallet af markører, der vurderes på én gang, hvilket helt sikkert oversættes til en stigning i følsomheden af denne metode.
Derfor bruges det ikke kun til diagnosticering af neoplastiske sygdomme, men også til at vurdere effektiviteten af behandlingen.
Om forfatteren
Læs flere artikler af denne forfatter
